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南方农村报

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可能原因有三种

猪场检测假阳性

来源:南方农村报时间:2020年06月27日版次:10
  快速、准确、敏感的检测技术在非洲猪瘟综合防控中发挥着关键作用,但多数猪场在监测存在一些误区和盲点,操作不当,造成检测结果失真。
  1、样品保存或运输不当,导致样品DNA降解。
  为避免此类情况,采样后尽快进行检测或运输,如需要长时间运输可在样品中加DNA保存液,并加入干冰运输。在实验室检测时,也应尽快进行,如当天检测不完,可先提取DNA,将DNA进行冻存后,次日进行检测。
  2、检测方法不敏感,造成假阴性检测结果。
  普通PCR或试纸条检测方法的灵敏度较差,易产生假阴性结果,不利于非瘟病毒的诊断。建议选择敏感度高、重复性好的荧光定量PCR检测试剂盒,或实验室自行建立和优化荧光定量PCR方法。
  3、实验室局部气溶胶污染,产生假阳性检测结果。
  实验室检测的污染主要由样品采集不当、样品间交叉污染及PCR体系中的试剂耗材污染等三方面所引起。为避免此类情况,建议做好以下四点:
  ①样品检测时,样品的处理、DNA的提取及PCR反应等实行分区操作,并且每个区域内的物品专用,做到人流、物流单向流动。
  ②定期使用紫外线、臭氧、DNA裂解液等对生物安全柜、超净台、离心机及实验室进行消毒;合理通风也是避免污染的有效措施。
  ③整个PCR体系是一个时间长且繁杂的过程,在进行检测时要设置无模板、阴性样品、阳性样品和环境样品等对照,最好设立内对照,通过这四个方面对整个检测过程进行监控。
  ④在保证扩增效率的前提下,把PCR反应体系中的胸腺嘧啶替换为尿嘧啶,从而使PCR产物中含有大量尿嘧啶,下次PCR反应前加入尿嘧啶糖苷酶降解产物,可消除PCR产物的残留污染。         □吴家强
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