南方农村报记者　王之娴

　　在蓝耳防控中,猪场通常会使用ELISA检测试剂盒检测抗体来对场内蓝耳病免疫和感染情况进行监测。但是最近据一些猪场反应,使用一些检测试剂盒对经典株蓝耳苗(也包括一些高致病性蓝耳病毒株疫苗)进行免疫抗体监测,会出现免疫一段时间后抗体检测结果阴性的情况。那么到底是疫苗出了问题使得免疫没有产生保护?还是试剂盒指示出现了问题?猪场对此表示很困惑。
蓝耳ELISA抗体检测误导免疫效果?
　　勃林格动保亚洲兽医研发中心疫苗研发负责人袁世山表示,不仅在国内,实际上在国外也会出现这样的问题,“在美国明尼苏达开始区域控制的时候,通过闭圈群免,连续3-4个月以后,整体抗体检测全部变阴性。”
　　勃林格殷格翰全球PRRS高级技术经理Poul　H,Rathkjen也表示ELISA的结果并不能正确反映猪群的免疫和感染状态,有时候反而会被误导。“只有当猪群在阴性的情况下,ELISA的结果可以确切反映猪群感染情况,但是如果猪群处于免疫状态或者处于阳性状态,免疫了一段时间后野毒没有了,这时可能会出现ELISA抗体值下降甚至是阴性。这并不能说明疫苗免疫效果的问题。反而当猪场出现新病毒感染的时候,我们会发现ELISA的值上升了,然而猪场却可能会误认为是监测的信号。”
　　因此勃林格建议免疫后对断奶仔猪、保育猪、育肥猪采血或唾液使用PCR做监测来评估猪群的免疫状态。
ELISA抗体曲线并不能评估猪群保护效力
　　相关试剂盒公司也给出了解释,表示在对经典株蓝耳苗免疫进行监测时,确实会出现一段时间后某些猪只呈现抗体阴性的检测结果,但并不是全部。出现这种结果可能是猪体与毒株相适应的现象,但并不代表此类“阴性”猪体是抗原或者抗体阴性。虽然呈现的抗体阴性,但其与真正的阴性猪是不同的,免疫正常的情况下依然对病毒具有抵抗力。并且由于不同感染时期抗原和抗体表现上会有差异,抗体检测结果与PCR检测结果也会出现一部分不吻合的情况。
　　同时试剂盒公司方面认为,猪场对蓝耳病抗体的监测不能仅仅通过一两次单纯的抗体水平、或者S/P值结果来说明问题。他们强调对抗体的监测是一个连续的过程,且这个连续的过程描述的是一个猪群感染风险、状态,而不是猪场的免疫保护效力。
　　据介绍,通过连续的长时间的采样、检测,然后可以做出来一个抗体水平的曲线。如果一个猪场在防控过程中这个抗体曲线很稳定,没有忽高忽低,那么证明这个猪场的蓝耳防控是没有问题的。而如果在某个时间点,突然出现了抗体水平的跳升,或者出现较大的波动,那么很大程度上说明猪场受到野毒感染了。这是对群体来说的,那么对个体来说,评价某一头猪是否受到感染,需要做某个时间点前后的双份血清的抗体检测结果对比。如果之前检测是如前文所说的免疫后抗体阴性的情况,之后检测却出现抗体转阳,那么提示这头猪可能受到了感染。
建议以糖蛋白抗体水平来判断猪群是否处于保护状态
　　关于蓝耳检测问题常常让猪场很迷惑,ELISA方法依然是目前可推行的主要方法。目前国内用的最多的蓝耳ELISA检测试剂盒有两类,一类是检测N蛋白的试剂盒,一类是检测糖蛋白的试剂盒。
　　一些业内人士认为免疫后检测不到抗体可能与试剂盒是N蛋白试剂盒有关。对此中科基因首席科学家遇秀玲解释,病毒感染首先激发的是核衣壳N蛋白,但与蓝耳病毒免疫原性相关性更好的是膜上的糖蛋白。“核酸相关蛋白产生的抗体只代表是不是有感染,与保护相关性不大。”遇秀玲说。“而糖蛋白抗体产生时间晚,但与免疫保护相关性更好,且持续时间长,所以通常推荐用它来做抗体水平监测,监测猪群是否处在保护状态。”
　　另外,检测不到N蛋白抗体也不代表猪本身已经转化成蓝耳阴性猪。“我们经常会看到母猪生出来的仔猪使用N蛋白试剂盒检抗体阴性,但把这样的猪视为阴性猪去做动物实验,实验结果是不成立的。”遇秀玲说。
　　同时遇秀玲也同意,如果是一个没有感染过蓝耳病的地区或场,可以用N蛋白检测试剂盒来做防控预警。“一旦出现N蛋白抗体在没有免疫的情况下出现一个跳升,一定是和蓝耳病发病临床过程相关性很大。”